какие клетки окрашиваются что такое витальный краситель

При изучении живых объектов, особенно обладающих небольшими размерами, нередко применяется окрашивание витальными красителями, т. е. такими, которые в известных концентрациях окрашивают объект, не убивая его. Различают основные и кислые витальные красители, причем при зоологических работах чаще применяются первые.

Необходимо отметить, что при обычных условиях витальные красители не окрашивают ядра живой клетки или в очень малой степени окрашивают основное вещество протоплазмы. Краски адсорбируются главным образом различными клеточными включениями. При длительном воздействии на клетки краски откладываются в протоплазме в виде гранул.

Мы не можем здесь рассматривать теорию витального окрашивания и ограничимся указанием некоторых наиболее распространенных основных красителей.

Нейтральный красный особенно часто применяется для витального окрашивания простейших, при изучении у них процессов внутриклеточного пищеварения и т. д. Применяется в очень слабых концентрациях от 0,1 до 0,001 %-ного. В более крепких концентрациях убивает клетку. Нейтральный красный является индикатором. В кислой среде он имеет ярко-красный оттенок, в щелочной — желтоватый.

Конго красный дает коллоидные растворы с малой степенью дисперсности, поэтому лишь с трудом проникает в протоплазму. Является индикатором, в кислой среде синий, в щелочной — красный. Применяется главным образом при изучении внутриклеточного пищеварения.

Метиленовый синий — один из обычных витальных красителей. Применяется, как и нейтральный красный, в очень слабых концентрациях. Иногда служит для окрашивания некоторых систем органов — нервной системы, выделительной системы (например, у Dinophilus).

Янус зеленый занимает среди прижизненных красителей особое положение. Он окрашивает избирательно митохондрии. Используются очень слабые водные растворы (0,01—0,05%-ные). Окраску объекта лучше вести, не покрывая покровным стеклом. Это связано с тем, что для окраски митохондрий необходимо наличие свободного кислорода.

Источник

ВИТАЛЬНАЯ ОКРАСКА

ВИТАЛЬНАЯ ОКРАСКА (лат. vitalis жизненный, живой) — прижизненная окраска животных или растительных клеток и тканей. С этой целью пользуются почти безвредными или малотоксичными красителями. Впервые витальное окрашивание произвел австрийский ученый Унгер (F. Unger, 1848), который ввел в белые лепестки гиацинта сок красных плодов Phytolacca. В гистофизиологии животных В. о. с помощью аммиачного кармина и индиго-сернокислого натрия впервые была применена русским ученым Н. А. Хржонщевским (1864, 1866) при исследовании функции почек и печени.

В. о. является одним из важных экспериментальных методов цито- и гистофизиологии. Иногда В. о. используется в клинике в качестве функциональной пробы при изучении физиологической полноценности почек (см. Хромоцистоскопия).

С помощью В. о. возможно: 1) изучение закономерностей поступления, накопления и выделения веществ, участвующих в метаболизме организма; 2) визуальное исследование некоторых физиол, процессов (секреции, экскреции); 3) маркировка определенных участков организма (органов, эмбриональных зачатков животных и растений, клеток или их органелл); 4) изучение физиол, состояния клетки в норме и при различных раздражающих и повреждающих воздействиях; 5) обнаружение в клетке определенных хим. веществ (нуклеиновых кислот, белков). Наиболее удобный объект для проведения В. о.— культуры клеток и тканей, однако В. о. успешно применяется и для кусочков органов и даже небольших животных и растений, целиком погружаемых в краситель. В. о. проводится также путем инъекции красителя в животную или растительную ткань. Распределение красителя в клетках и тканях обычно наблюдают под светооптическим микроскопом, а в тех случаях, когда для В. о. используют флюоресцирующие красители (флюорохромы),— с помощью люминесцентного микроскопа, что значительно повышает чувствительность исследования.

Для В. о. используют гл. обр. различные анилиновые красители, применяемые при гистол, методах исследования: кислотные (анионные), основные (катионные) и нейтральные (цветн. рис. 1—3). Водные растворы кислотных красителей плохо проникают в нормальную клетку. Поскольку проницаемость резко повышается при повреждающих воздействиях, эти красители (эозин) используют для выявления клеточного повреждения. Коллоидные растворы кислых красителей (трипановый синий, литиевый кармин и др.) проникают в клетку путем фагоцитоза и используются гл. обр. для изучения ретикулоэндотелиальной системы.

Основные красители, как правило, хорошо проникают в живую клетку. Их дальнейшее распределение в клетке зависит от ее состояния. В неповрежденной или мало поврежденной клетке основные красители аккумулируются в лизосомах в виде ясно выраженных цитоплазматических гранул, поэтому флюорохром акридиновый оранжевый широко используется для прижизненного выявления лизосом. При значительном повреждении клетки прекращается накопление красителей в лизосомах и появляется диффузная окраска ядра и цитоплазмы. Изменение окраски может носить обратимый характер — так наз. паранекроз (см.).

Особое место среди основных красителей занимает янус зеленый, обладающий способностью избирательно аккумулироваться в митохондриях; его широко используют для их прижизненного выявления.

Многие нейтральные или слабо-ионизированные основные красители и флюорохромы (фосфин 3R, бензпирен) обладают хорошей растворимостью в жирах и поэтому применяются для прижизненного выявления жировых включений.

Безвредность красителей, применяемых для В. о., относительна, они всегда влияют на те или иные клеточные процессы: янус зеленый блокирует дыхание, акридиновый оранжевый тормозит синтез белка; длительное воздействие нейтральным красным, акридиновым оранжевым, толуидиновым синим и т. п. приводит к агглютинации рибосом с образованием так наз. кринома — базофильной цитоплазматической структуры, возникающей в клетке под влиянием В. о.

Библиография: Граменицкий E. М. Прижизненная окраска клеток и тканей в норме и патологии, Л., 1963, библиогр.; Зеленин А. В. Взаимодействие амино-производных акридина с клеткой, М., 1971, библиогр.; Левин С. В. и Гольфанд К. А. Методика цитофотометрии витально окрашенных клеток, Цитология, т. 6, № 4, с. 525, 1964, библиогр.

Ю. И. Афанасьев, С. Я. Залкинд.

Источник

ВИТА́ЛЬНОЕ ОКРА́ШИВАНИЕ

Том 5. Москва, 2006, стр. 390

Скопировать библиографическую ссылку:

ВИТА́ЛЬНОЕ ОКРА́ШИВАНИЕ (при­жиз­нен­ное ок­ра­ши­ва­ние), ме­тод ок­ра­ши­ва­ния жи­вых кле­ток спец. кра­си­те­ля­ми, при­ме­няе­мы­ми в не­ток­сич. кон­цен­тра­ци­ях. Та­ки­ми кра­си­те­ля­ми мо­гут быть ос­но́в­ные (напр., ме­ти­ле­но­вый си­ний) и ки­слот­ные (напр., фе­но­ло­вый крас­ный). Про­ни­кая в клет­ки жи­вот­ных, од­ни кра­си­те­ли диф­фуз­но ок­ра­ши­ва­ют ци­то­плаз­му, дру­гие кра­си­те­ли от­кла­ды­ва­ют­ся в ви­де гра­нул в об­лас­ти ком­плек­са Голь­джи, ос­тав­ляя яд­ро и ци­то­плаз­му не­ок­ра­шен­ны­ми. При по­вре­ж­де­нии кле­ток ок­ра­ши­ва­ние диф­фуз­ны­ми кра­си­те­ля­ми уси­ли­ва­ет­ся, гра­ну­ляр­ные же те­ря­ют спо­соб­ность об­ра­зо­вы­вать гра­ну­лы и ок­ра­ши­ва­ют ци­то­плаз­му и яд­ро диф­фуз­но. В жи­вых клет­ках рас­те­ний кра­си­те­ли кон­цен­три­ру­ют­ся в ва­куо­лях, в мёрт­вых – про­кра­ши­ва­ют весь про­то­пласт. Эти осо­бен­но­сти да­ют воз­мож­ность от­ли­чать мёрт­вые и по­вре­ж­дён­ные клет­ки от жи­вых. Ко­ли­че­ст­вен­ный учёт свя­зан­но­го клет­ка­ми кра­си­те­ля по­зво­ля­ет су­дить о бо­лее тон­ких сдви­гах в их функ­цио­наль­ном со­стоя­нии. Ки­слот­ные гра­ну­ляр­ные кра­си­те­ли при­ме­ня­ют­ся для вы­яв­ле­ния эле­мен­тов ре­ти­ку­ло­эн­до­те­ли­аль­ной сис­те­мы и изу­че­ния их со­стояния; ме­ти­ле­но­вый си­ний – для из­би­ра­тель­ной ок­ра­ски отд. ней­ро­нов. Рас­пре­де­ле­ние в клет­ках флуо­рес­цент­ных кра­си­те­лей ис­поль­зу­ет­ся для оцен­ки жиз­не­спо­соб­но­сти кле­ток и при про­ве­де­нии не­ко­то­рых ци­то­хи­ми­че­ских ис­сле­до­ва­ний.

Источник

Какие клетки окрашиваются что такое витальный краситель

Электроодонтометрия — определение порога чувствительности пульпы к электрическому току. Она основана на раздражении пульпы зуба электрическим током и улавливании минимальной силы тока, которая вызывает первое (слабое) болевое ощущение. Здоровая пульпа зуба реагирует на ток силой 2—6 мкА. Снижение возбудимости до 20—40 мкА свидетельствует о воспалении коронковой пульпы, реакция зуба на ток силой 60 мкА — о вовлечении в патологический процесс и корневой пульпы. Реакция на ток силой 100 мкА и выше подтверждает наличие некроза пульпы.

Рентгенография

Рентгенологическое исследование зубов и челюстей имеет важное диагностическое значение. При диагностике кариеса к рентгенографии прибегают в случае подозрения на образование кариозной полости на контактной поверхности зубов при их тесном расположении, когда дефект твердых тканей недоступен осмотру и зондированию.

Рентгенография — эффективный метод исследования при диагностике хронических апикальных периодонтитов. Это исследование позволяет выявить анатомическое строение корней зубов и каналов, их число, форму и полозкение в челюсти, наличие облитерации полости зуба, состояние периодонта и костной ткани; четко определить переломы корней зубов и самой челюсти, степень заполнения корневых каналов пломбировочным материалом, наличие инородных тел в канале корня, степень резорбции альвеолярного отростка. Панорамная рентгенография дает возможность получить изображение всего зубного ряда.

Витальное окрашивание

Витальное окрашивание основано на повышении проницаемости пораэкенных кариесом твердых тканей зубов для водных растворов красителей (метиленовый синий или красный). При контакте с растворами красящих веществ в участках деминерализации твердых тканей краситель сорбируется, тогда как неизмененные ткани не окрашиваются. С помощью этого метода удается не только выявить очаговую деминерализацию эмали, но и судить об активности патологического процесса. Наибольшее распространение получило окрашивание эмали и дентина 2 % водным раствором метиленового синего. При этом на поверхность зубов, предварительно очищенную, высушенную и изолированную ватными валиками, наносят на 3 мин краситель, после чего тампоны удаляют и смывают с зуба остатки красителя. Оценку окрашивания эмали проводят либо с помощью специальной шкалы, имеющей различные оттенки синего цвета, либо визуально, подразделяя интенсивность на легкую, среднюю и высокую, что соответствует степени деминерализации эмали.

Витальное окрашивание применяют и для индикации пораженного дентина на дне кариозной полости (краситель вносят на 1 мин), а также для контроля за эффективностью реминерализирующей терапии, дифференциации начального кариеса (стадия пятна) от флюороза и гипоплазии. При последних, как и при интактной эмали, прокрашивания тканей зуба не происходит. После проведения данного теста цвет эмали восстанавливается до нормального в течение получаса.

Высушивание эмали

Высушивание эмали — наиболее простой и довольно эффективный метод, позволяющий выявлять даже очаги подповерхностной деминерализации, обнаружение которых под слоем слюны практически невозможно. Исследуемый зуб тщательно очищают от налета и после высушивания определяют границы и размеры очага деминерализации. Этот метод применяется и при диагностике кариеса аппроксимальных поверхностей.

Источник

• ← какие клетки образуются путем митоза
• какие клетки организма нуждаются в кислороде более всего →