какие методы исследования используют в цитологии
Методы изучения клетки: какие методы используются в цитологии
Содержание:
Методы изучения клетки. Таблица
| Название | Краткое описание методов изучения клетки |
| Световая микроскопия | В световом микроскопе объект освещается видимым светом. Можно рассмотреть внешнее и внутреннее строение клетки, мембрану, клеточную стенку, ядро, органеллы и включения размером более 200 нм. |
| Электронная микроскопия | Метод получил развитие в начале 30-х г. XX в. после изобретения электронного микроскопа. Возможно изучение объектов размером 1 нм, освещенных пучком электронов. |
| Центрифугирование | Метод избирательного изучения органоидов клетки. Образец вращают при помощи специальной центрифуги для разделения содержимого клетки на слои. Ультрацентрифугирование — метод выделения биохимических структур и молекул, входящих в состав клетки. |
| Авторадиография | Заменяют атомы углерода или других элементов на радиоактивные изотопы. Метод меченых атомов помогает наблюдать за процессами перемещения органелл и веществ внутри клеток. |
| Клеточные культуры | Выращивание колоний клеток на питательных средах для последующего изучения. |
Микроскопия
Информацию в таблице «Методы цитологии» рекомендуется дополнить рассказом о световом и электронном микроскопах. Начало изучения микромира связано с изобретением первого светового микроскопа в 1590 году (братьями Янсен). Первые исследования клеточного строения живых организмов с помощью микроскопа выполнили Р. Гук (1665 г.) и А. Левенгук (1696 г.).
Исторически первый метод исследования в цитологии не растерял своего значения до наших дней. Современные методы изучения клетки — фазово-контрастная и интерференционная микроскопия. Разновидности световых микроскопов позволяют различать тонкие детали в живой клетке без ее фиксации и окрашивания.
Особенности метода электронной микроскопии:
Какие методы используются в цитологии, во многих случаях зависит от особенностей объектов. Флуоресцентная микроскопия предназначена для изучения образцов с собственной флуоресценцией, таких как хлорофилл, который в синем свете флуоресцирует красным. Можно исследовать и другие объекты, предварительно окрасив их определенными флуоресцентными красителями.
Флуоресцентный и конфокальный микроскопы позволяют получать изображения некоторых объектов с максимальным разрешением. Трансмиссионный микроскоп дает изображение среза «на просвет». Сканирующий электронный микроскоп дает объемные изображения объектов.
В настоящее время жизнь клетки исследуют на уровне органелл, молекул и атомов. В цитологии используют методы молекулярной биологии, гистологии, микробиологии, биохимии, физиологии. Смежные науки развиваются в тесном контакте друг с другом. Подразделы биологии используют сходные методы исследования, а открытия в одной области оказывают влияние на развитие других дисциплин.
Цитологические исследования. Общая информация
«Цитологическое исследование – исследование, основанное на изучении с помощью микроскопа особенностей строения клеток, клеточного состава органов, тканей, жидкостей организма человека и животных в норме и при патологических процессах. Диагностическое цитологическое исследование сходно с гистологическим исследованием биопсийного материала по цели (прижизненное распознавание патологического процесса), методической основе (морфологический анализ), объекту исследования (компоненты патологических участков органа и ткани), методам окраски ядра, цитоплазмы и других компонентов клетки” (Большая медицинская энциклопедия, 1986).
Цитологическая диагностика зарекомендовала себя как важный метод морфологической верификации диагноза. Она широко используется с целью раннего выявления и лечения предопухолевых процессов и рака, позволяет установить природу различных заболеваний, помочь клиницисту определить тактику лечения больных, осуществить динамическое наблюдение, выявить рецидивы. Цитологическое исследование имеет большое значение в практическом здравоохранении; нередко оно оказывается единственным морфологическим методом, на результате которого основывается лечение.
Организм человека – целостная система, которая состоит более чем из 200 разновидностей клеток, межклеточных пространств, организованных в ткани, органы. В некоторых органах и тканях присутствуют микроорганизмы, а также вирусы, которые способны значительно влиять на работу этих органов и тканей. Это, образно названное Рудольфом Вирховым, клеточное государство содержит около 220 млрд. клеток, каждая из которых предназначена к выполнению определенных функций. Слаженная работа всех морфологических структур регулируется сложными процессами; каждый человек представляет собой индивидуальность, и имеет предрасположенность к определенным заболеваниям, которые могут проявиться или не проявиться в течение жизни. Также индивидуальна реакция разных организмов на различные этиологические агенты, способные вызвать заболевание. Цитологическое исследование позволяет изучить под микроскопом клеточный состав различных органов и тканей, сопоставить найденные изменения с клиническими сведениями и результатами дополнительных исследований (инструментальных, лабораторных, микробиологических, генетических и др.), при необходимости коллегиально оценить полученные данные с целью выработки индивидуального плана лечения больного.
Решающую роль в установлении цитологического диагноза играет получение качественного материала, стандартизация приготовления препаратов, практический опыт врача-цитолога, его интуиция, возможность собрать в одно целое различные признаки (с учетом фона препарата, особенностей клеток и их расположения).
В практической работе цитологическую диагностику отличает простота, быстрота, возможность легко повторить исследование. Области применения цитологической диагностики включают:
Вместе с тем цитологическая диагностика, как все диагностические методы, имеет определенные ограничения, связанные со способом получения материала, качеством приготовления мазка и его окрашивания, локализацией патологического очага, особенностями его гистологического строения. При неудачах цитологического исследования может быть упущена возможность своевременного лечения; ошибочный диагноз может повлечь за собой выполнение неадекватной врачебной тактики, лучевого лечения, химиотерапии, операций большого объема, иногда калечащих пациента. Можно выделить несколько основных аспектов, ограничивающих возможности цитологической диагностики:
Какие методы исследования используют в цитологии
Рассмотрите таблицу «Методы биологических исследований». Запишите в ответе пропущенный термин, обозначенный в таблице вопросительным знаком.
| Частнонаучный метод | Применение метода |
|---|---|
| Близнецовый | Определение роли факторов среды в формировании фенотипа человека |
| ? | Изучение особенностей фаз митоза на фиксированном Микроскопия – изучение морфологии клетки. Хроматография – физико-химический метод, используемый в цитологии для разделения смеси веществ, основанном на разной скорости движения веществ через адсорбент, например, разделение смеси пигментов растений. Метод меченых атомов – введение в вещество радиоактивного изотопа химического элемента для изучения путей его превращения в клетке. Метод используется для изучения жизнедеятельности клетки. Биохимический метод – метод, используемый в цитологии для обнаружения и оценки количества веществ в клетках и тканях организмов, изучение структуры веществ. Центрифугирование – метод разделения клеточных структур и макромолекул с помощью центрифуги, позволяющий дифференцировано осаждать клеточные структуры, отличающиеся друг от друга своей массой. Метод культуры клеток и тканей – изучение жизнедеятельности клеток и тканей путем культивирования их на искусственных средах. Гибридологический – генетический анализ потомства (гибридов), полученного от родителей, отличающихся по одному или нескольким признакам. Цитогенетический – изучение количества и структуры хромосом с помощью микроскопа, позволяет выявить хромосомные (изменение структуры хромосом) и геномные (изменение количества хромосом) мутации. Близнецовый – метод сравнительного изучения наследования признаков у близнецов, позволяет установить роль среды и наследственности в определении признака. Генеалогический – изучение наследование признака на основе анализа родословных, позволяет определять характер наследования признака, а также особенности наследования признаков, обусловленных генными мутациями. Популяционно-статистический – определение частоты встречаемости различных генов в популяциях организмов. Особенности фаз митоза на фиксированном препарате изучают методом микроскопии. Какие методы исследования используют в цитологииИсследование, направленное на выявление количественных и качественных изменений клеток, наличия внутри- и внеклеточных включений и микроорганизмов в биоматериале, полученном при оперативном вмешательстве. Используется для диагностики широкого спектра онкологических, инфекционных, аутоиммунных и идиопатических заболеваний различных систем и органов. Цитологический мазок, мазок на цитологию. Cytopathology, Smear tests, Imprint cytology. Какой биоматериал можно использовать для исследования? Мазок на предметном стекле. Общая информация об исследовании Цитологическое исследование – метод лабораторной диагностики, позволяющий выявить качественные и количественные изменения клеток, наличие внутри- и внеклеточных включений и микроорганизмов. Исследоваться могут мазки-отпечатки, смывы, соскобы с поверхности органов и тканей, а также жидкости полостей тела, полученные при оперативном вмешательстве. Наибольшее значение имеет интраоперационное цитологическое исследование, применяемое для диагностики и определения тактики лечения опухоли в процессе оперативного вмешательства. Точность цитологического исследования несколько различается в зависимости от того, с какого органа или ткани был получен мазок. Наибольшая частота ложноотрицательных результатов наблюдается при исследовании мазков-отпечатков молочной железы, лимфатических узлов, щитовидной железы, яичника и мягких тканей. Диагностика злокачественного образования с помощью цитологического метода особенно трудна при наличии высокодифференцированных опухолей, включая тубулярную и лобулярную карциному молочной железы, высокодифференцированную фолликулярную карциному щитовидной железы, саркому низкой степени злокачественности и пограничную цистаденому яичника. Такие опухоли, как инфильтративный рак желудка, скирр молочной железы, опухоль Крукенберга и Бреннера, некоторые опухоли мягких тканей и кожи, имеют выраженный фиброзный компонент, что также затрудняет проведение полноценного цитологического анализа. Частота ложноотрицательных результатов цитологического исследования составляет около 6 %. Таким образом, отрицательный результат цитологического исследования недостаточен для исключения злокачественного образования. Метод характеризуется высокой специфичностью, приближающейся к 100 %. Это означает, что обнаружение в мазке-отпечатке злокачественных клеток в сочетании с видимыми невооруженным глазом анатомическими изменениями (плюс-ткань, язва, стриктура) практически позволяет установить диагноз. Благодаря высокой специфичности цитологическое исследование мазков-отпечатков используется для интраоперационного стадирования рака молочной железы. Так, обнаружение клеток аденокарциномы в сторожевом лимфоузле обуславливает необходимость лимфаденэктомии. Следует отметить, что отсутствие признаков малигнизации в сторожевом узле не позволяет полностью исключить наличие метастазов. Это особенно характерно при наличии микрометастазов, а также при метастазировании высокодифференцированных опухолей. Так, например, чувствительность цитологического анализа мазка-отпечатка лимфоузла при наличии метастазов лобулярной карциномы составляет около 38-66 %. Чувствительность цитологического исследования также зависит от способа окраски мазка. Результат интраоперационного цитологического исследования может быть получен в более короткие сроки, чем гистологический анализ криостатных срезов, при этом точность обоих методов сопоставима. Для чего используется исследование? Когда назначается исследование? Что означают результаты? Причины патологических признаков Причины отсутствия патологических признаков: Что может влиять на результат? Кто назначает исследование? Онколог, хирург, пульмонолог, ревматолог, врач общей практики. Какие методы исследования используют в цитологииЦитологическое исследование — это оценка характеристик морфологической структуры клеточных элементов с целью установления диагноза доброкачественной или злокачественной опухоли и неопухолевых поражений. Оно основано на изучении с помощью микроскопа особенностей строения клеток, клеточного состава органов, тканей, жидкостей организма человека в норме и при патологических процессах. Отличие цитологического исследования от гистологического заключается в том, что изучаются не срезы тканей, а клетки. При распознавании рака в самых начальных стадиях цитологический метод иногда имеет преимущества по сравнению с другими диагностическими тестами. Хорошо известны случаи цитологической диагностики клинически, рентгенологически и эндоскопически «немого» рака желудка, легкого, мочевого пузыря и др. Наибольшее распространение цитологические исследования получили в области гинекологии, для того, чтобы диагностировать заболевания шейки матки на ранней стадии. В Лаборатории цитологии НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова выполняются следующие виды цитологических исследований:
Цены на некоторые основные виды исследований: Исследование цитологических препаратов Просмотр и консультация врачом готовых цитологических препаратов (до 5 стекол) Исследование цитологических препаратов на Helicobacter pylori Исследование цитологических препаратов с помощью жидкостной цитологии Иммуноцитохимическое исследование материала (1 антитело) Исследование плоидности ДНК опухоли с помощью анализа микроизображения можно найти в прайс-листе, воспользовавшись быстрым поиском
|
